Różnorodne technologie do kompleksowego testowania przeciwciał
Zalety immunoblotów EUROIMMUN
W immunoblotach, w celu wykrycia specyficznych przeciwciał w próbkach pacjentów, jako fazę stałą wykorzystuje się antygeny opłaszczone na membranach. Wykonywanie testu może być manualne, półautomatyczne lub w pełni zautomatyzowane. Jeśli próbka zawiera specyficzne przeciwciała, wiążą się one z antygenami na membranie. W kolejnym etapie dodaje się przeciwciało (koniugat) znakowane fosfatazą alkaliczną (AP), które wiąże się ze swoistymi przeciwciałami. Fosfataza alkaliczna katalizuje reakcję barwną z dodanym w następnej kolejności chlorkiem tetrazolu/fosforanem 5-bromo-4-chloro-3-indolilu (NBT/BCIP). Jeśli w próbce pacjenta obecne są specyficzne przeciwciała, to w pozycji odpowiedniej dla danego antygenu pojawia się ciemna linia. Intensywność uzyskanego barwienia jest proporcjonalna do stężenia przeciwciał w próbce.
EUROLINE
Testy EUROLINE to wieloparametrowe bloty, które umożliwiają generowanie kompleksowych profili przeciwciał na jednym pasku testowym. Jako fazę stałą zawierającą antygen stosuje się paski membran z wieloma oczyszczonymi, scharakteryzowanymi biochemicznie antygenami lub ekstraktami antygenów w postaci cienkich równoległych linii. Membrany są mocowane jako chipy w dokładnie określonych miejscach na foliach z tworzywa sztucznego. Paski membrany nie zawierają zbędnych białek, które mogą prowadzić do nieswoistych wyników dodatnich. Na każdym pasku testowym EUROLINE znajduje się pasek kontrolny, który wskazuje, czy poszczególne etapy inkubacji zostały wykonane prawidłowo. Ocena jest wykonywana w pełni automatycznie za pomocą oprogramowania EUROLineScan.
Westernblot i EUROLINE-WB
Jako fazę stałą zawierającą antygen stosuje się paski do blottingu. Powleka się je ekstraktami antygenów rozdzielonymi elektroforetycznie według masy cząsteczkowej.
Testy EUROLINE-WB są połączeniem testów Westernblot i EUROLINE. Paski Westernblot są dodatkowo powlekane wysoko oczyszczonymi antygenami natywnymi lub rekombinowanymi w postaci chipów membranowych. Prawidłowe wykonanie poszczególnych etapów inkubacji jest wskazywane przez barwienie paska kontrolnego na dolnym końcu każdego paska. Ocena jest wykonywana w pełni automatycznie za pomocą oprogramowania EUROLineScan.
EUROMikrobloty
Test EUROMicroblot to zminiaturyzowana technologia immunoblot wykorzystująca klasyczną 96-dołkową mikropłytę ELISA. Dzięki odłamywanym studzienkom liczbę wykonywanych badań można łatwo dopasować do potrzeb laboratorium. Dołki mikropłytki zawierają paski testowe z nadrukowanymi w określonych miejscach oczyszczonymi antygenami i kontrolami. Za pomocą immunoblotów w formacie mikropłytki testy przesiewowe i potwierdzające można przeprowadzać w jednym zautomatyzowanym systemie ELISA i optymalnie wykorzystywać wolne miejsca w aparacie. Ocena jest przeprowadzana w pełni automatycznie przy użyciu Microwell Imager i oprogramowania EUROLineScan.