Jednym z kryteriów rozpoznania neuroboreliozy jest wykrycie wewnątrzoponowej syntezy przeciwciał anty-Borrelia. Jest to możliwe m.in. poprzez wyliczenie współczynnika wewnątrzoponowej syntezy przeciwciał anty-Borrelia (CSQrel), co wiąże się z koniecznością pobrania dwóch próbek: płynu mózgowo-rdzeniowego (PMR) i surowicy. Z filmu dowiesz się, jak dokonać obliczeń i jak prawidłowo zinterpretować otrzymane wyniki
0:28 Jak wygląda diagnostyka neuroboreliozy?
1:25 Oznaczanie wewnątrzoponowej syntezy przeciwciał metodą immunoblot
Jak wygląda diagnostyka neuroboreliozy?
Jednym z kryteriów rozpoznania neuroboreliozy jest wykrycie wewnątrzoponowej syntezy przeciwciał anty-Borrelia. Jest to możliwe m.in. poprzez wyliczenie współczynnika wewnątrzoponowej produkcji przeciwciał anty-Borrelia (CSQrel). Wyliczenie wspomnianego wskaźnika wiąże się z koniecznością pobrania dwóch próbek – płynu mózgowo-rdzeniowego (PMR) i surowicy. Ważne, aby obie próbki pobrane były tego samego dnia (najlepiej w ciągu 1 godziny). Następnie w obu próbkach oznacza się:
- specyficzne przeciwciała anty-Borrelia w klasie IgG lub IgM metodą ELISA
- specyficzne przeciwciała anty-Borrelia w surowicy (IgG lub IgM) metodą ELISA
- całkowity poziom przeciwciał w danej klasie (IgG lub IgM) w PMR
- całkowity poziom przeciwciał danej klasy (IgG lub IgM) w surowicy
- poziom albumin w PMR
- poziom albumin w surowicy
Na podstawie oznaczonych parametrów wylicza się wskaźnik wewnątrzoponowej syntezy przeciwciał, której wartość powyżej 1,5 może wskazywać na wewnątrzoponową produkcję przeciwciał anty-Borrelia
Od pewnego czasu metodą alternatywną do badania wewnątrzoponowej syntezy przeciwciał anty-Borrelia są testy typu lineblot. Badanie należy wykonać równolegle w dwóch próbkach: w surowicy i w PMR. Zaleca się 4-krotne rozcieńczenie PMR (250 µl płynu mózgowo-rdzeniowego + 750 µl buforu do rozcieńczania). Rozcieńczenie surowicy powinno być obliczone indywidualnie dla każdego pacjenta na podstawie albumin i całkowitego poziomu przeciwciał klasy IgM lub IgG w PMR i surowicy. Obliczeń dokonuje się w programie komputerowym.
Do programu zostają wprowadzone wartości (mg/l):
- stężenie całkowitego IgG (lub IgM) w surowicy
- stężenie całkowitego IgG (lub IgM) w PMR
- stężenie albumin w surowicy
- stężenie albumin w PMR
Na podstawie wprowadzonych danych program automatycznie oblicza współczynniki: CSQcałk.IgG, CSQAlb., CSQLim. oraz odpowiednie rozcieńczenie surowicy. Dodatkowo podaje objętości surowicy i buforu uniwersalnego, jakich należy użyć do otrzymania wyliczonego rozcieńczenia surowicy.
Interpretacja wyniku
Interpretacji wyniku dokonuje się na podstawie porównania liczby i intensywności wybarwionych prążków antygenowych w surowicy i PMR.
- Jeżeli liczba wybarwionych prążków antygenowych w PMR jest większa niż liczba w surowicy − wykryto wewnątrzoponową syntezę przeciwciał anty-Borrelia.
- Jeżeli liczba prążków antygenowych w PMR jest równa liczbie prążków antygenowych w surowicy lub mniejsza − program automatycznie porówna intensywność wybarwienia prążków współistniejących.
- Jeżeli intensywność wybarwienia prążków antygenowych w PMR jest większa (min. 1,5 raza) niż w surowicy – oznacza to, że wykryto wewnątrzoponową syntezę przeciwciał anty-Borrelia.
- Jeżeli wspomniane warunki nie zostały spełnione, wewnątrzoponowa synteza przeciwciał anty-Borrelia jest mało prawdopodobna.
- Jeżeli zarówno liczba, jak i intensywność prążków antygenowych w PMR jest równa liczbie i intensywności prążków antygenowych w surowicy lub mniejsza − nie potwierdzono produkcji specyficznych przeciwciał w płynie mózgowo-rdzeniowym.
Patryk Matuszek
Ekspert ds. Szkoleń i Wystąpień Publicznych, Senior Product Manager ds. Boreliozy