Nowatorski test CBA (ang. cell based assay), oparty na komórkach transfekowanych, umożliwia czułe i swoiste wykrywanie przeciwciał IgM przeciwko glikoproteinie związanej z mieliną (MAG), występujących w neuropatiach demielinizacyjnych. Najnowsza publikacja na ten temat ukazała się w renomowanym czasopiśmie „Frontiers in Neurology” dzięki współpracy naukowców z Uniwersytetu w Weronie oraz Instytutu Badań Pediatrycznych w Padwie (Włochy). Test Anty-MAG CBA jest obecnie dostępny z certyfikatem CE-IVDR.

CBA w diagnostyce przeciwciał anty-MAG

Przeciwciała anty-MAG klasy IgM są markerami autoimmunizacyjnego schorzenia demielinizacyjnego, które dotyczy obwodowego układu nerwowego i objawia się zaburzeniami czucia. Wykazano, że przeciwciała te odgrywają patogenną rolę w przebiegu choroby, co potwierdzają badania histopatologiczne nerwów. Rozpoznają epitop HNK-1 (ang. human natural killer-1), który jest silnie ekspresjonowany na MAG.

Test CBA wykorzystuje transfekowane ludzkie komórki, które ekspresjonują antygen MAG/HNK-1. Zastosowanie tej technologii pozwala na zachowanie natywnej konformacji antygenu w błonie komórkowej, co umożliwia detekcję przeciwciał rozpoznających epitopy konformacyjne. Równolegle z komórkami transfekowanymi inkubowany jest biochip zawierający komórki nieekspresjonujące antygenu MAG/HNK-1 – obecność tej kontroli znacząco ułatwia interpretację wyniku.

W niedawno przeprowadzonym badaniu porównano test CBA z testem ELISA, który obecnie uznawany jest za „złoty standard” w diagnostyce przeciwciał anty-MAG klasy IgM. Analizę przeprowadzono na podstawie surowic od 95 pacjentów wykazujących kliniczne i neurofizjologiczne cechy neuropatii związanej z obecnością przeciwciał anty-MAG oraz 55 próbek kontrolnych od pacjentów z innymi postaciami neuropatii obwodowej. W porównaniu z testem ELISA, test CBA osiągnął czułość na poziomie 98,9% oraz swoistość 100%. Dodatnia wartość predykcyjna wyniosła 100%, a ujemna — 98,2%.

Zalety technologii CBA i jej zastosowanie w diagnostyce przeciwciał antyneuralnych

Technologia CBA posiada liczne zalety. Standaryzowana procedura minimalizuje zmienność między seriami testów i umożliwia efektywne przygotowanie dużych, standaryzowanych partii substratu w krótkim czasie. Stabilność fluorescencji pozwala na analizę szkiełek przez wiele osób oraz łatwą wymianę obrazów między ośrodkami. Procedura analizy jest prosta i może być wykonywana w każdym laboratorium doświadczonym w technice immunofluorescencji pośredniej. Testy CBA są już szeroko stosowane w wielu laboratoriach do wykrywania innych przeciwciał antyneuralnych, np. przeciwciał przeciwko antygenom powierzchniowym neuronów w autoimmunologicznym zapaleniu mózgu czy przeciwciał przeciwko akwaporynie 4 w NMOSD (ang. neuromyelitis optica spectrum disorder).

Autorzy badania podsumowują, że test CBA to prosta i wiarygodna metoda wykrywania przeciwciał przeciwko MAG, stanowiąca czułą i swoistą alternatywę dla bardziej czasochłonnej metody ELISA. Test CBA pozwala również na oznaczanie poziomu przeciwciał dzięki możliwości wykonywania oznaczeń przy różnych rozcieńczeniach surowicy, co ma istotne znaczenie dla oceny korelacji klinicznych. Planowane są większe badania obserwacyjne, które mają na celu określenie zależności między mianem przeciwciał anty-MAG a aktywnością kliniczną, aby potwierdzić i rozszerzyć dotychczasowe dane.

Test Anty-MAG CBA uzupełnia unikalne portfolio produktów EUROIMMUN w zakresie testów do wykrywania przeciwciał antyneuralnych, obejmujące ponad 60 autoprzeciwciał, w tym wiele nowatorskich i unikalnych parametrów.

Tłumaczenie: https://www.euroimmunblog.com/novel-cell-based-assay-for-autoantibody-detection-in-demyelination/