Test T-SPOT.TB oparty o technologię ELISPOT służy do diagnostyki latentnej postaci gruźlicy (ang. latent tuberculosis infection, LTBI). Technologia ta przeznaczona jest do oceny komórkowej odpowiedzi immunologicznej i pozwala na określenie rzeczywistej aktywności wydzielniczej badanych komórek. Test T-SPOT.TB jest testem typu IGRA (ang. interferon gamma release assay) i umożliwia wizualizację limfocytów T produkujących interferon gamma (IFN-γ).
T-SPOT.TB – test do zadań specjalnych
Test T-SPOT.TB jest nazywany testem do zadań specjalnych, ponieważ ze względu na standaryzację liczby limfocytów poddanych analizie doskonale sprawdza się u osób z obniżoną odpornością, u których może wystąpić np. limfopenia. Na wysoką skuteczność testu wpływają ponadto znormalizowane warunki hodowli komórek – przed procesem inkubacji są one przemywane w celu usunięcia białek surowicy, które mogłyby niekorzystnie wpływać na wynik. Z uwagi na wysoką czułość i swoistość diagnostyczną test ten jest zalecany u osób z grup podwyższonego ryzyka, np. zakażonych wirusem HIV, przyjmujących leki immunosupresyjne czy seniorów.
Automatyzacja testu T-SPOT.TB – zestaw T-Cell Select i urządzenie AutoPure 2400
Zestaw T-Cell Select oraz urządzenia z serii AutoPure pozwalają na zautomatyzowanie procesu izolacji jednojądrzastych komórek krwi obwodowej PBMC (ang. peripheral blood mononuclear cell), w skład których wchodzą limfocyty T, przy zastosowaniu procedury ich magnetycznego sortowania. Dzięki temu próbki krwi zachowują stabilność do 54 godzin od momentu ich pobrania od pacjentów.
Rysunek 1. Etapy izolacji PBMC przy użyciu T-Cell Select i urządzenia AutoPure wyposażonego w magnes
Do tej pory w ofercie EUROIMMUN znajdowały się dwa urządzenia, które umożliwiają izolację frakcji PBMC od reszty komórek w próbce krwi pełnej: AutoPure 10B i 20B. Od niedawna na rynku dostępne jest nowe urządzenie AutoPure 2400, które pozwala na automatyzację całego pierwszego dnia inkubacji testu T-SPOT.TB, a dokładniej:
- izolację i przemywanie PBMC,
- przygotowywanie komórek PBMC do liczenia,
- utworzenie odpowiedniego rozcieńczenia zawiesiny komórkowej dla każdego pacjenta,
- przygotowanie płytki: nałożenie roztworów antygenów, kontroli pozytywnej i negatywnej oraz zawiesiny komórkowej pacjenta.
AutoPure 2400 pozwala na przebadanie w jednym cyklu 24 próbek w czasie krótszym niż trzy i pół godziny przy minimalnej interakcji ze strony pracowników laboratorium. Zautomatyzowany proces jest bardziej wydajny, umożliwiając zmniejszenie nakładu pracy i skrócenie czasu spędzonego przy urządzeniu.
Rozwiązania do automatyzacji testu T-SPOT.TB można dopasować do przepustowości laboratorium i jego wymagań!
Izabella Podsiadły
Specjalista ds. Informacji Naukowej, Junior Product Manager ds. Diagnostyki Gruźlicy